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T7 RNA聚合酶 (1 KU/μL)說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間:2023-10-24      點(diǎn)擊次數(shù):557

T7 RNA聚合酶 (1 KU/μL)說(shuō)明書(shū)

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產(chǎn)品詳情
T7 RNA Polymerase,即T7 RNA聚合酶,是T7噬菌體DNA編碼的酶,對(duì)T7啟動(dòng)子序列具有高度特異性 。本酶是依賴于DNA的RNA聚合酶,具有 5′→3′的RNA聚合酶活性,可以催化單鏈或雙鏈DNA T7啟動(dòng)子下游NTP的摻入,合成與T7啟動(dòng)子下游的模板DNA互補(bǔ)的RNA。
特點(diǎn)
該酶對(duì)T7啟動(dòng)子具有高度特異性,不識(shí)別其它生物來(lái)源的啟動(dòng)子??梢宰R(shí)別修飾的核苷酸,例如生物素標(biāo)記、熒光素標(biāo)記、放射性同位素、地高xin標(biāo)記dNTP,用于各種標(biāo)記RNA的合成,進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。
來(lái)源:攜帶T7 RNA聚合酶基因的E. coli
分子量:99 kDa
純度:≥90%
比活:1 KU/μL
比活單位定義:在37℃、1小時(shí)內(nèi)使1 nmol的CMP摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位
存儲(chǔ)緩沖液:50 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,20 mM β-ME,1 mM EDTA,50% 甘油,0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.9
產(chǎn)品包裝規(guī)格及組成
產(chǎn)品編號(hào)產(chǎn)品名稱規(guī)格產(chǎn)品組成

10×Transcription BufferMg 2+ (400 mM)T7 RNA Polymerase (1 KU/μL)
78MRNA-1104AT7 RNA聚合酶 (1 KU/uL)50 KU150 uL100 uL50 uL
78MRNA-1104BT7 RNA聚合酶 (1 KU/uL)200 KU500 uL500 uL200 uL
78MRNA-1104CT7 RNA聚合酶 (1 KU/uL)1000 KU1.25 ml×22 mL1 mL
質(zhì)量控制
1. SDS-PAGE膠檢測(cè)僅可見(jiàn)清晰單一的目的條帶,毛細(xì)管電泳檢測(cè)純度在95%以上;
2. 酶動(dòng)力學(xué)實(shí)時(shí)熒光法顯示無(wú)DNA酶及RNA酶污染。
應(yīng)用舉例
【RNA 體外轉(zhuǎn)錄合成 】
1. 在RNase free的離心管中加入右側(cè)表格中各組分配制反應(yīng)體系;
2. 將上述反應(yīng)液混合均勻,低速離心至管底,37 ℃孵育4個(gè)小時(shí)。若轉(zhuǎn)錄本長(zhǎng)度小于100 nt,增加反應(yīng)時(shí)間至4-8個(gè)小時(shí);
3. 轉(zhuǎn)錄后取樣品進(jìn)行凝膠電泳,取樣1 μL稀釋到5 μL,然后用1%的瓊脂糖凝膠進(jìn)行檢測(cè),以確定轉(zhuǎn)錄是否成功;
4. 反應(yīng)完成后,加入DNase Ⅰ(RNase free),37 ℃孵育30 min以去除模板DNA
組分體積
DNase/RNase-Free WaterUp to 20 uL
ATP/CTP/GTP/UTP (100 mM each)2 uL each
10×Transcription Buffer2 uL
DNA template0.5 ~ 2 ug
RNase Inhibitor (40 U/u L)0.5 uL
Inorganic Pyrophosphatase (0.1 U/uL)0.5 uL
T7 RNA Polymerase (1 KU/uL)0.2 ~ 1 uL
Mg 2+ (400 mM)1 uL
Total Volume20 uL
運(yùn)輸與保存
運(yùn)輸條件:藍(lán)冰/干冰運(yùn)輸
保存溫度:-20 ℃以下保存
避免反復(fù)凍融或頻繁暴露于溫度變化中,shou次使用時(shí)建議進(jìn)行分裝。
產(chǎn)品效期:12個(gè)月
注意事項(xiàng)
1. 使用時(shí)宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后宜立即放置于-20 ℃保存;
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作;
3. 產(chǎn)品僅供研究使用。


貨號(hào)品名規(guī)格品牌
78MRNA-1104AT7 RNA聚合酶 (1 KU/μL)50 KU

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78MRNA-1104BT7 RNA聚合酶 (1 KU/μL)200 KU

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78MRNA-1104CT7 RNA聚合酶 (1 KU/μL)1000 KU

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